还原型半胱氨酸(Cys)

当您使用标准质量文件 aa_mass.mss 时,Cys 被定义为组成 C3H4N1O1S1,因此其单同位素质量为 102.00 Da。在这种情况下,Cys 的氧化状态(即它是作为二硫键的一部分被氧化,SS,还是处于还原态,SH)由主工具栏中质量文件选择框旁边的“SS”按钮控制。

您现在可以通过点击 'SS' 按钮,在单击中将序列中的所有 Cys 残基从氧化状态更改为还原状态 - 按钮的图例将变为 'SH'。您还会注意到,桌面上的任何蛋白质的质量对于序列中的每个 Cys 残基都会增加一个。

如何修改所有我的 Cys 残基?

分析蛋白质时执行的典型反应是还原和烷基化所有 Cys 残基,以破坏二硫键并使半胱氨酸抵抗意外修饰。在 GPMAW 中,最简单的方法是更改质量文件。这将导致重新计算所有包含质量值的序列窗口。

GPMAW 提供的默认文件如下:

文件 衍生化 注释/衍生化试剂
aa_mass.mss 标准质量文件。Cys 最初根据设置(显示默认值)定义为还原/非还原 cys,然后根据 SS/SH 按钮确定
acetamid.mss 乙酰胺 碘乙酰胺
ae_cys.mss 氨基乙基
cmcys.mss 羧甲基 碘乙酸
cysacid.mss 氧化 半胱磺酸
pe_cys.mss 吡啶乙基 乙烯基吡啶

通过编辑质量文件并以新名称保存,您可以创建其他修饰。

如何修改单个 Cys 残基?

如果您需要修改单个残基,您可以双击该残基并在 Modify residue 对话框中输入修饰,或者您可以右键单击该残基并从弹出菜单中选择第二个选项,Modify Cys-xx,您可以在其中直接选择多个修饰。

如果您选择选项 Reduced Cys,将向指定的 Cys 残基添加一个氢原子,并且该残基将保持还原状态,因此您可以混合氧化和还原的 Cys 残基!

当通过任一方法进行修饰时,Cys 残基将保持修饰状态,而不考虑 'SS' 按钮的状态。

 

 

 

 


 

 

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